如果在進行檢測樣品前，體視顯微鏡的光源.聚光鏡.物鏡.目鏡.光闌的中心光軸沒能與體視顯微鏡的光軸形成一條統一的點化直線。那就會影響到檢測的觀察效果。
體視顯微鏡的光軸調節如下：
①調節體視顯微鏡的燈絲光源
調節燈比光源只針對沒有光源預定心設置的體視顯微鏡，進行燈炮位置的調節。
②調節體視顯微鏡的孔徑光闌
通過體視顯微鏡的聚光鏡外則，邊緣上的刻度值與定位記號來調節，聚光鏡與物鏡的數值孔徑相匹配（通常用物鏡的孔徑數值*0.6（0.8）=聚光鏡的數值孔徑）。
③調節體視顯微鏡聚光鏡的中心位置
聚光鏡的中心位置，也是體視顯微鏡光軸的重點調節位置。具體調節方法如下：先用十倍物鏡進行檢測觀察，且在目鏡視場內能看到視場光闌的輪廓。通過聚光鏡外側的兩個調整螺釘，將光闌輪廓調到中間位置。再慢慢地增加視場光闌調節，可以看到光束向著視場的四周均勻的伸展開，并且直到視場光闌的輪廓象與視場邊緣完全內接，即表示已經調節好光束和軸。光束和軸后再稍微增加一下視場光闌，使目鏡內的輪廓像剛好處于視場外切或略大的狀態。
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